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Western溶液套装(封闭液、洗涤液、一抗二抗稀释液)

Western溶液套装(封闭液、洗涤液、一抗二抗稀释液)

分类:

免疫印迹检测系统 - 蛋白检测

说明书:

AR1201

240元/kit  

WB

WB辅助试剂

现货

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Product Brief

  • 产品概况

    产品货号AR1201
    产品名称Western溶液套装(封闭液、洗涤液、一抗二抗稀释液)
    产品规格

    Western封闭液                        100ml

    Western洗涤液                        100ml(10×)

    Western一抗二抗稀释液           100ml×2  

    按照每次Western blot需要封闭液10ml、一抗稀释液10ml、二抗稀释液10ml、洗涤液30ml+30ml+30ml=90ml,约100ml计算,一个包装的本试剂盒,大约可以进行10次Western Blot检测。

    保存条件4℃保存,一年有效。 
    产品简介

           Western溶液套装是一种包含了Western Blot实验过程中常用的封闭液、洗涤液、一抗和二抗稀释液的溶液套装。

           本产品中的一抗二抗稀释液可以用于Western时一抗和二抗的稀释和配制。其主要有效成分为经过反复优化的适量BSA、适当的去垢剂和抗体稳定试剂等,一方面能有效减少一抗二抗的非特异性结合,另一方面能有效提升稀释后抗体的稳定保存时间。使用本Western一抗二抗稀释液稀释的一抗可以在4℃保存和使用不少于六个月,可以反复多次用于Western。经本Western一抗二抗稀释液稀释的二抗可以在1-2周内重复使用3-5次。
          本产品中的Western封闭液可以用于Western时转移了蛋白样品的PVDF膜或NC膜的封闭。其主要有效成分为经过反复优化的适量BSA和适当的去垢剂等,一方面能有效封闭膜上的蛋白结合位点,另一方面能有效减少后续一抗和二抗的非特异性结合,降低背景,增强信噪比。
          本产品中的Western洗涤液(10X)可以用于Western时一抗或二抗孵育后的洗涤。适当的洗涤可以降低背景,增强信噪比。

    注意事项

    1.取放PVDF膜和NC膜应使用平头镊子,并仅轻轻夹取其边角,操作过程须避免膜表面产生划痕、折痕或压痕等痕迹。
    2.PVDF膜一经浸润和活化,需一直保持湿润,根据Western进行到的具体步骤可放置于western转模液或洗涤液等适当溶液中,否则可能会产生难以封闭的异常背景。
    3.为了能使抗体可以反复多次使用,建议尽量在4℃进行一抗和蛋白膜的结合反应,以减缓一抗的衰减速度。
    4.通常在室温封闭60分钟即可。如果对于一些背景非常高的抗体,可以4℃封闭过夜。
    5.本Western洗涤液(10X)用蒸馏水稀释后使用,配制成Western洗涤液(1X)后,宜4℃保存,并在1-2个月内用完,如果室温保存,宜在1-2周内用完。

    使用说明

    1.Western一抗二抗稀释液
           a.参考所用的一抗的使用说明,以及样品中目的蛋白的含量,按照适当比例稀释一抗,一抗稀释后即可直接用于Western。一次Western结束后,可以回收稀释的一抗,4℃保存,以用于下次的Western。

           b.参考所用的二抗的使用说明,以及一抗的质量和样品中目的蛋白的含量,按照适当比例稀释二抗,二抗稀释后即可直接用于Western。一次Western结束后,可以回收稀释的二抗,4℃保存,以用于下次的Western,通常在1-2周内可以重复使用3-5次。
    2.Western封闭液
    完成转膜后,用稀释好的Western洗涤液洗涤膜,共洗涤3次,每次5分钟,加入Western封闭液,封闭60分钟,然后进行一抗孵育等后续操作。
    3.Western洗涤液(10X)
           a.取一瓶Western洗涤液(10X),倒入到一洁净的量筒中,加入蒸馏水混匀并定容到1升后即为Western洗涤液(1X),并可以用于Western的洗涤。没有用完的洗涤液可以室温保存,通常1-2周内是可以正常使用的。如果发现洗涤液出现浑浊、沉淀等异常现象,宜废弃。
           b.在一抗或二抗孵育结束后,加入少量Western洗涤液(1X),使之能盖住膜,在摇床上洗涤,共洗涤3次,每次5分钟,然后进行后续的操作。如果按照上述洗涤条件Western结果背景仍然较高,可以适当延长洗涤时间,并增加洗涤次数。通常,延长洗涤时间或增加洗涤次数不会对Western结果产生负面影响。



Instructions

暂无介绍

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